%0 Journal Article
%A 王泽琛
%A 肖荣
%A 欧阳乐军
%A 李莉梅
%A 梁楚炎
%A 潘璟茵
%A 刘智超
%T 基于CRISPR/Cas9的拟南芥CKX3基因编辑载体构建及转化研究
%D 2021
%R 10.7525/j.issn.1673-5102.2021.06.020
%J 植物研究
%P 1015-1022
%V 41
%N 6
%X <p>细胞分裂素（cytokinin，CK）是参与植物生长发育过程中的关键激素，在植物生长、发育过程起着非常重要作用。细胞分裂素氧化酶/脱氢酶（cytokinin oxidase/dehydrogenase，CKX）是一种不可逆降解细胞分裂素为腺嘌呤/腺苷的黄素酶，作为细胞分裂素信号中降解分支的关键酶，对于维持植物体内的细胞分裂素平衡有着重要作用，有效的控制了植物内源细胞分裂素的水平。选取拟南芥<i>CKX3</i>为目标基因，通过含有拟南芥种皮重组启动子与荧光筛选标记基因<i>mCherry</i>的CRISPR/Cas9载体，来进行高效的拟南芥<i>CKX3</i>基因编辑载体构建并转化拟南芥。利用倒置荧光显微镜筛选具有红色荧光的T<sub>0</sub>代种子并种植培养获得T<sub>1</sub>代植株。提取T<sub>1</sub>代植株基因组进行PCR鉴定和测序分析，鉴定纯合突变后代的性状表型及激素测定。结果表明，本实验成功构建了编辑载体pHEE401E-<i>mCherry</i>-<i>CKX3，</i>拟南芥转化后代中目标基因成功被高效编辑，<i>CKX3</i>的纯合突变植株表型与野生型差异明显，内源激素含量差异达到显著水平。为研究<i>CKX</i>基因功能奠定了基础。</p>
%U https://bbr.nefu.edu.cn/CN/10.7525/j.issn.1673-5102.2021.06.020