%0 Journal Article
%A 谭老喜
%A 张雨良
%A 周朋
%A 章绍延
%A 王健华
%A 张秀春
%A 刘志昕*
%T 感染BBTV香蕉叶片cDNA文库的构建及评价
%D 2013
%R 10.7525/j.issn.1673-5102.2013.06.013
%J 植物研究
%P 713-717
%V 33
%N 6
%X 为了研究香蕉束顶病毒与香蕉寄主致病的互作分子机制，本文报道利用Make Your Own&ldquo;Mate＆Plate<sup>TM</sup>&rdquo;Library System试剂盒成功构建感染BBTV香蕉叶片的cDNA文库。通过改良CTAB法提取感染BBTV香蕉叶片的总RNA，采用SMART法反转录合成双链cDNA，经<em>SfiI</em>酶切并去除短片段之后，与经同样酶切的pGADT7-SfiI载体连接，利用电转法将重组载体转化到大肠杆菌宿主细胞中，获得初级cDNA文库，最后以初级文库100万克隆为基数扩增，得到扩增文库并提取质粒。结果得到库容量大于2.0&times;10<sup>6</sup>的初级文库，检测表明文库cDNA插入片段长度主要分布在700~2 000 bp，文库重组率为87.5％。结果表明，该文库质量较好，可用于后续酵母双杂交互作蛋白筛选试验，本研究为开展病毒与寄主互作的研究奠定基础。
%U https://bbr.nefu.edu.cn/CN/10.7525/j.issn.1673-5102.2013.06.013